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人脐静脉内皮细胞永生化
AMNCELL-000026永生化细胞

人脐静脉内皮细胞永生化

该细胞来源于人静脉内皮,可在半固体培养基中形成克隆,在免疫抑制小鼠中不能形成肿瘤。 细胞特性 1) 来源:人脐带组织 2) 形态:内皮细胞样 贴壁生长 3) 含量:>1x10^6 细胞数 4) 规格:T25瓶 5) 用途:仅供科研使用。

价格¥3500(T-25*1瓶)

产品详情

组织来源

永生化人脐静脉内皮细胞采用酶解法和基因转染制备而来

细胞污染

HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

培养条件

永生化人脐静脉内皮细胞完全培养基

特征特性

脐带是胎儿和胎盘之间的连系结构。形状如绳索,表面光滑透明,内含结缔组织和一支脐静脉,一对脐动脉。脐静脉内皮细胞来源于正常人脐静脉血管内膜表面,呈单层扁平分布。该细胞在合成和分泌细胞因子、维持血管内外凝血和纤溶的的动态平衡中起重要作用。内皮细胞还释放控制细胞增殖和调节血管壁紧张度的分子。这些过程都可以用培养的细胞进行体外研究,人脐静脉和动脉内皮细胞是这类研究中最常用的细胞类型。

细胞冻存步骤

待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

复苏细胞步骤

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代步骤

如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。