人结肠癌肿瘤组织纤维细胞永生化
人结肠癌肿瘤组织成纤维细胞分离自患有结肠癌病人的结肠癌组织;结肠癌是常见的发生于结肠部位的消化道恶性肿瘤，好发于直肠与乙状结肠交界处，以 40~50 岁年龄组发病率， 男女之比为 2~3:1。发病率占胃肠道肿瘤的第 3 位。结肠癌主要为腺癌、黏液腺癌、未 分化癌。大体形态呈息肉状、溃疡型等。结肠癌可沿肠壁环行发展，沿肠管纵径上下蔓延或 向肠壁深层浸润，除经淋巴管、血流转移和局部侵犯外，还可向腹腔内种植或沿缝线、切口 面扩散转移。慢性结肠炎患者、结肠息肉患者、男性肥胖者等为易感人群。人结肠癌组织源 细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组 学、细胞株(系)研究、DNA，RNA 和遗传学研究等，还可应用于当今热门的生物医药产业 如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。人结肠癌组织源细胞在生物医药领 域有不可替代性作用。 本公司生产的永生化人结肠癌肿瘤组织成纤维细胞采用酶消化和 SV40T 制备而来，细胞总 量约为 5×105cells，细胞纯度可达 90%以上，且不含有 HIV-1、HBV、HCV、支原体、 细菌、酵母和真菌等。
产品详情
组织来源
原代结肠癌肿瘤组织成纤维细胞
形态特征
人结肠癌肿瘤组织成纤维细胞分离自患有结肠癌病人的结肠癌组织；结肠癌是常见的发生于结肠部位的消化道恶性肿瘤，好发于直肠与乙状结肠交界处，以40～50岁年龄组发病率最高，男女之比为2～3：1。发病率占胃肠道肿瘤的第3位。结肠癌主要为腺癌、黏液腺癌、未分化癌。大体形态呈息肉状、溃疡型等。结肠癌可沿肠壁环行发展，沿肠管纵径上下蔓延或向肠壁深层浸润，除经淋巴管、血流转移和局部侵犯外，还可向腹腔内种植
细胞污染
HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
培养条件
永生化结肠癌肿瘤组织成纤维细胞专用完全培养基
细胞冻存步骤
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
复苏细胞步骤
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代步骤
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。